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"翻转课堂"教学模式在国外已兴起数年,但多应用于小规模班级.结合国内计算机基础课程教学现状和学生特点,在"<em>大学</em>计算机"MOOC建设基础上,面向本科一年级新生,开展大规模班级教学环境下混合教学探索,将SPOC、翻转课堂、传统教学模式进行有机融合.历经一个完整教学环节的实践,证明了在大班教学环境下采用混合教学的可行性,以及混合教学在促进学生综合能力提升方面的显著效果.

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MOOC SPOC 本科新生 大规模班级 大学计算机 混合教学 能力培养

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2012年起，大规模在线开放课程（Massive Online Open Courses，MOOC）开始在全球兴起。MOOC既是面向社会学习者的课堂，也是面向校园学习者的资源，但MOOC的属性决定了教学管理上的难度。因此，无论是面向社会、还是面向校园，通过跟踪MOOC学习者学习状态、为学习者提供个性化学习管理，从而提升学习效果，已成为急需解决的问题。 本文首先研究了基于本体的领域知识建模，详细讨论了学习者模型（Learner Model, LM）的建模方法，在对学习行为信息获取和处理的基础上，选取学习者学习行为特征，利用遗传算法建立了MOOC学习者模型。基于MOOC学习者模型，研究分析了学习者的学习行为数据，并结合“期望模型”和“参考模型”，跟踪学习者的学习进度和学习状况，分析和评价了学习者的知识状态；利用聚类研究分析了学习行为与学习效果之间的相关性，以及学习行为对学习效果的影响；最后设计并实现了一种在线学习管理系统，完成了对学习者学习状况的动态跟踪和即时提醒，为 MOOC 学习者提供个性化服务。 本文设计并实现的在线学习管理系统，通过开放学习者模型（Open Learner Model，OLM）和数据可视化技术，将学习者模型内容以及对学习者行为的分析结果以可视化的方式呈现给学习者，使学习者能够了解自己的总体学习状况，实现即时提醒，从而达到管理、督促的效果。论文的研究结果已应用于本校翻转课堂教学，经两个教学大班的实际应用，取得了良好效果。

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MOOC OLM 个性化学习服务 学习行为分析 学习者模型

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一种基于计算机领域知识体系的B/S模式自动组卷方法，包括如下步骤：一：根据组卷条件，判断当前题库情况是否满足组卷要求，否则重新设置组卷参数；二：在已构建领域知识体系基础上，采用随机抽取算法，按照知识模块及模块内知识单元顺序，遵循未被抽取过题目的知识点优先原则，依次循环为各试卷抽取指定题型中之前未被抽取过的题目，直到抽取完条件要求的全部题目；三：题目抽取完成后，计算各试卷中每类题型的平均难度值，否则采用循环替换算法进行难度值调整，直到满足要求；利用本发明，可解决需要同时编组多套试卷时，要求确保多份试卷完全无试题重复、各试卷知识点分布均衡且最大化、各试卷相同题型难度一致、并可灵活设定组卷范围的需求。

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目的:比较人端粒酶催化亚单位(hTERT),癌胚抗原(CEA)及巨细胞病毒(CMV)启动子在人结肠癌细胞株LoVo和SW480中的转录活性.方法:设计引物应用PCR法从人结肠癌基因组中克隆hTERT和CEA启动子;用双酶切和PCR法切除原始载体pLVX-EGFP-3FLAG中的CMV启动子后,将hTERT,CEA启动子与该载体重组,构建出重组质粒pLVX-hTERTp-EGFP-3FLAG和pLVX-CEAp-EGFP-3FLAG;将上述两种质粒及原始载体(含CMV启动子)分别瞬时转染人结肠癌细胞株LoVo和SW480后,检测两种细胞株绿色荧光蛋白表达.结果:经PCR,酶切及测序鉴定,克隆及载体构建完全正确.CMV,hTERT及CEA启动子的转录活性(绿色荧光细胞数/总细胞数)在LoVo细胞中依次为54.7％,33.0％,9.5％;在SW480中依次为16.5％,10.1％,8.5％,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论:在人结肠癌细胞株中,转录活性以CMV启动子最高,hTERT启动子次之,CEA启动子最低.该结果可为结肠癌的靶向性基因治疗研究提供参考.

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结肠肿瘤 转录启动子 转染

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一种用于乳腺癌患者术后恢复的伤口压迫装置，由棉布松紧背心及设置于棉布松紧背心内的可调节正压充气气囊组成，所述可调节正压充气气囊包括气囊和充气手柄，其中所述气囊设置于棉布松紧背心的胸壁及腋窝部位，用于在充气手柄的作用下，向胸壁及腋窝施加压力，本实用新型将可调节正压充气气囊放置入棉布松紧背心内衬中，使用可调节正压充气气囊加压，同时压迫胸壁和腋窝两处伤口，且可拆洗，达到实用、美观、舒适的目的，本实用新型不但能从生理上促进乳腺癌病人的术后恢复，减少并发症的发生，还能帮助患者保持健康的心态，促进心理健康，在临床工作中有很高的应用价值。

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背景：肿瘤的基因治疗，是将外源性基因设法导入细胞中并有效表达，以治愈或改善肿瘤预后的方法。使外源性基因完整地进入细胞需要载体。目前，慢转录病毒载体作为改良后的逆转录病毒载体，具有容量大、可感染分裂期和非分裂期的细胞、在宿主细胞中稳定表达的优点，是当今肿瘤基因治疗中的一种被广泛应用的载体。为确保其安全性，本课题选择缺氧和端粒酶两个实体瘤特有的靶点，调节目的基因的表达。实体瘤中都存在慢性缺氧的微环境，细胞内缺氧诱导因子（HIF-1）的水平会显著升高，并作为转录激活因子上调缺氧反应相关蛋白的表达。HIF-1的转录激活作用是通过结合在这些基因5’端上游的缺氧反应元件（HRE）区实现的。在不同基因的启动子中，HRE具有相当高的同源性，且其重复的次数也没有基因特异性，集中在5~9次。因此，在实体瘤的基因治疗中，可以利用肿瘤的缺氧微环境，使用HRE作为靶点。在几乎所有肿瘤细胞中，都出现了一种新的反转录酶——端粒酶，在染色体末端进行逆转录反应，延续端粒序列。端粒酶是由RNA模板（TERC）和端粒酶催化亚单位（TERT）组成的。其中，TERC在正常细胞中即可检出，而TERT只在肿瘤细胞中存在。hTERTp在肿瘤细胞中的普遍高活性和在正常细胞中的低活性或无活性，使其成为了肿瘤细胞的又一理想靶点。尾型同源盒基因2（CDX2）是肠特异性转录因子的一种。在胚胎发育过程的早期就出现，决定器官发生和肠上皮分化。在成人，CDX2仅在肠道上皮中特异性表达，在肠上皮细胞分化中起着重要作用。CDX2的表达缺失几乎在所有结直肠腺癌中都可发现。结直肠癌的发病率和死亡率在全世界范围内都排在前列，但其主要的治疗方式仍以传统的外科治疗和放、化疗为主。在肿瘤基因治疗高速发展的今天，我们拟用诱导肿瘤细胞分化的方法，构建向结直肠癌细胞中导入CDX2基因的载体。在靶向性及安全性方面，我们选择5个拷贝的HRE序列和作为启动子的hTERTp，利用肿瘤细胞缺氧和端粒酶活性高的特性，靶向性启动CDX2的表达，与正常细胞区别开来。目的：构建5个拷贝的HRE和hTERTp双靶向调控，表达CDX2基因的慢病毒表达载体，并在结肠癌LoVo细胞中进行功能验证。方法：选用慢病毒表达载体pLVX-EGFP-3FLAG。（1）在Genbank上查找hTERTp序列，设计PCR引物（含HindIII 和PstI酶切位点），从人结肠癌标本中提取目的片段hTERTp，构建pLEGFP-hTERTp，将本课题组已构建的载体pLEGFP-5HRE-CEAp应用HindIII 和PstI双酶切，hTERTp连入线性化的pLEGFP-5HRE-CEAp，构建pLEGFP-5HRE-hTERTp；（2）以pLEGFP-5HRE-hTERTp为模板，设计PCR引物（含MluI和XhoI酶切位点），提取5HRE-hTERTp基因序列，同时通过MluI和XhoI双酶切切除pLVX-EGFP-3FLAG载体上的CMV启动子使pLVX-EGFP-3FLAG线性化，同源重组构建pLVX-5HRE-hTERTp-EGFP-3FLAG载体；（3）以本课题组已构建的GV230-CDX2-EGFP载体为模板，设计PCR引物（含EcoRI和BamHI酶切位点），提取CDX2基因序列，同时通过EcoRI和BamHI双酶切切除pLVX-5HRE-hTERTp- EGFP-3FLAG载体上的EGFP使其线性化，同源重组构建pLVX-5HRE-hTERTp- CDX2-3FLAG载体；（4）应用pLVX-5HRE-hTERTp-EGFP-3FLAG载体瞬时转染体外培养的人结肠癌LoVo细胞，通过观察绿色荧光蛋白EGFP的表达，鉴定hTERTp的转录活性；（5）应用pLVX-5HRE-hTERTp-EGFP-3FLAG载体及pLVX-5HRE-hTERTp- CDX2-3FLAG载体瞬时转染体外培养的人结肠癌LoVo细胞，免疫组化观察FLAG蛋白的表达鉴定此载体的表达情况。结果：经PCR和测序分析，pLEGFP-5HRE-hTERTp、pLVX-5HRE-hTERTp-EGFP- 3FLAG、pLVX-5HRE-hTERTp-CDX2-3FLAG三组质粒与设计一致，测序正确。将pLVX-5HRE-hTERTp-EGFP-3FLAG载体瞬时转染体外培养的人结肠癌LoVo细胞，有绿色荧光表达，说明hTERT启动子存在转录活性。将pLVX-5HRE-hTERTp-EGFP- 3FLAG载体及pLVX-5HRE-hTERTp-CDX2-3FLAG载体瞬时转染体外培养的人结肠癌LoVo细胞，通过免疫组化发现均有标签抗原FLAG表达，hTERT启动子可以启动下游基因表达。结论：成功构建了pLVX-5HRE-hTERTp-CDX2-3FLAG载体，为后续的体外和体内实验奠定了基础。但其双靶向调控功能仍需进一步实验证明。

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缺氧端粒酶肿瘤基因治疗慢病毒载体结直肠癌

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