背景：
原发性肝癌（primary　liver　cancer，PLC）是我国最常见的恶性肿瘤之一，其中肝细胞癌（hepatocellular　carcinoma，HCC）占90%以上，其恶性程度高，病程进展快，转移、复发率高，使其预后差，严重影响居民健康。肝癌的转移一直是困扰医学界的难题，其转移是一个多步骤、多因素共同参与的过程，机制复杂，肿瘤细胞离开原发灶，到远处的靶器官并增殖形成转移瘤，肿瘤细胞的独立存活是关键步骤。肿瘤细胞与周围的基质细胞脱离接触并未像正常细胞一样凋亡，是因为肿瘤细胞获得了抗失巢凋亡的能力，抗失巢凋亡（Anoikis）能力的获得是肿瘤细胞转移的前提。
BDNF（脑源性神经生长因子）是神经生长因子家族的一员，主要与受体TrkB（一种原癌基因编码的蛋白）结合启动下游信号发挥生物学效应，近年来发现这一信号通路与多种肿瘤的发生发展密切相关。在肝癌患者的癌组织及血清中均发现BDNF的高表达，且其表达水平与肝癌的转移、复发表现出明显的相关性。体外的研究表明其可以促进肝癌细胞的增殖、侵袭、转移，而对正常的肝细胞无此作用。以往的研究表明，转染了TrkB基因的大鼠肠上皮细胞可以获得抗失巢凋亡的能力。
目的：
建立失巢凋亡模型，研究BDNF在肝癌细胞株中的表达及对肝癌细胞株SMMC-7721细胞体外增殖及失巢凋亡的影响。
方法：
ELISA法检测不同肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2、Hep3B及正常肝细胞L02贴壁培养24小时培养上清中BDNF中的表达水平；　polyHEMA包被的方法建立失巢凋亡模型；MTT实验检测不同浓度BDNF对贴壁培养的肝癌细胞SMMC-7721增殖的影响；平板克隆实验检测不同浓度BDNF对肝癌细胞SMMC-7721克隆形成率的影响；计数的方法绘制失巢状态下肝癌细胞SMMC-7721的生长曲线；流式细胞术检测不同浓度的BDNF对其失巢状态下凋亡率的影响。统计分析用SPSS13.0软件完成，所有数据均以均数士标准差表示，采用单因素方差分析比较处理因素的影响，两组间的比较采用多个样本均数间的多重比较。P＜0.05说明差异有统计学意义。
结果：
在不同的肝癌细胞株培养上清中均检测到BDNF的表达，24小时肝癌细胞Hep3B、
SMMC-7721、HepG2培养上清中浓度分别为74.6.士7.1pg/ml、94.8士10.2pg/ml、100.5士7.8pg/ml（取95%可信区间)，正常肝细胞上清中未检测到BDNF的表达；成功建立失巢凋亡模型，在失巢状态下，细胞聚集成团悬浮生长；外源性的BDNF能够促进肝癌细胞株SMMC-7721的增殖，BDNF浓度小于75ng/ml时，随着浓度的增加，增值效应增强，BDNF浓度100ng/ml与75ng/ml差异无统计学意义（p＞0.05)；BDNF能促进SMMC-7721细胞克隆的形成，浓度为25ng/ml、50ng/ml、75ng/ml克隆率（分别为63.8士2%、74.3士3%、81.6士2%)比不加BDNF克隆率（54.6士3%）高，差异有统计学意义（p＜0.05）;细胞在失巢状态下数目无明显变化；各浓度BDNF均能抑制SMMC-7721细胞的失巢凋亡（0ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、75ng/ml对应的凋亡率分别为28.94士3.25%、14.1士2.14%、12.36士2.43%、10.82士1.53%），但各组之间无差异（p＞0.05）。
结论：
polyHEMA包被的方法可以建立体外失巢凋亡模型；肝癌细胞自身能够分泌BDNF，BDNF可能通过促进肝癌细胞的增殖，抑制肝癌细胞的失巢凋亡在肝癌的发生发展中发挥作用。