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14-3-3蛋白是一个重要的信号分子蛋白家族,在真核生物中具有高度的同源性,无论从结构上来分析,还是从它的功能来看。14-3-3蛋白能结合及调节多种胞内蛋白的重要功能蛋白,参与调控多种关键的细胞反应过程,诸如代谢、信号传导、细胞周期控制、凋亡、蛋白运输、转录和细胞的恶性转化等多种生理过程的调节。在脊椎动物中,14-3-3蛋白至少由七种不同的基因编码,根据逆向层析洗脱的顺序人们将牛脑中提出的14-3-3亚型命名为η、β、γ、σ、τ、ε、ζ。后来从其他动物中提取的14-3-3蛋白亚型也用此法命名。人类14-3-3蛋白家族的这七个不同亚型,虽然从结构上是高度保守的,功能却不完全一致。在所有已知的14-3-3蛋白的互作蛋白中,有些蛋白如Raf-1,Bad,几乎能结合所有的14-3-3蛋白亚型,并具有同样的亲和性。但是,有些蛋白如A20,Cdc25B,p27kip1和不同的14-3-3蛋白亚型间的相互作用具有明显差异性。这似乎表明14-3-3不同的亚型和不同配体蛋白的结合具有不一样的亲和性。目前,已报道有四型能与WEE1蛋白激酶互作,即小鼠14-3-3ζ,爪蟾14-3-3ε以及人14-3-3σ和14-3-3β能与WEE1发生相互作用。为了解WEE1与这些14-3-3蛋白的互作是否具有亚型的特异性,我们克隆了人类14-3-3蛋白家族的七个亚型,分别从体内和体外实验验证了七个14-3-3的亚型蛋白都是WEE1的调节蛋白之一。然而这种相互作用的强弱,即就是14-3-3蛋白亚型与WEE1激酶的亲和力并不完全相同。其中,14-3-3η和14-3-3ζ最强,其次是14-3-3ε、γ、σ,而14-3-3β和14-3-3τ相互作用的最弱。在细胞周期试验中,我们发现14-3-3蛋白家族都能部分增强WEE1诱导的G2/M期的阻滞。该结果进一步说明了14-3-3蛋白家族确实是WEE1功能作用的重要调节蛋白。
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Degree: 理学硕士
Mentor: 马建岗
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Year: 2006
Language: Chinese
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